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Protocolo para NIH 3T3
células NIH3T3 são amplamente utilizados em laboratórios de pesquisa para virologia, celular e experimentos de biologia molecular. A linha de células de fibroblasto embrionário do mouse foi desenvolvido por George Todaro e Howard Green , em 1962, na Universidade de Nova Iorque.

Células NIH3T3 Médio crescer ligado a pratos de plástico em um grau centígrado 37 incubadora ( 99 graus Fahrenheit ) . Seu meio de crescimento é Meio de Eagle Modificado por Dulbecco suplementado com 10% de soro de vitelo - não o soro fetal bovino a 10% que outras linhas celulares preferem
Propagação

Divide NIH . 3T3 cada 2 a 3 dias - é importante que eles não serão autorizados a tornar-se demasiado densa. Remova o meio de cultura usado e lave o prato com tampão fosfato . Incubar as células em tripsina para retirar as células e controlar o distanciamento com um microscópio . Quando as células são arredondadas e separadas , agite -as delicadamente com uma pipeta . Adicionar meio de crescimento completo para parar a reacção enzimática . Re -plate as células em 300 mil células por 10 cm ( 3,9 polegadas ) prato.
Usa

NIH3T3 são usados ​​para crescer vírus da leucemia murina ou funcionar como células imobilizadas , ou camadas alimentadoras , que fornecem factores de crescimento necessários para as células , tais como células estaminais e queratinócitos . Eles foram cultivadas em seda de aranha em experimentos projetados para descobrir biomateriais com potencial para a regeneração de tecidos.

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