cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC ) é um método comum de análise de laboratório em que uma amostra é separado nos seus constituintes químicos , como é passa através de uma coluna . A coluna é enchida com um enchimento poroso tipicamente baseado em gel de sílica tratada . Uma coluna de fase reversa padrão , tais como um C8 , pode por vezes tornar-se obstruídos , ou contaminada . Essas colunas muitas vezes pode ser regenerada usando algumas técnicas simples . Coisas que você precisa
instrumento HPLC
Água
Metanol
Acetonitrile
Isopropanol
Diclorometano
hexano
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Regeneração de uma Coluna
1

Retire a coluna suja e reverter a sua posição, de modo que a fase móvel está agora a entrar no que é normalmente a saída da coluna. Anexar uma linha de saída para o outro lado da coluna (o fim que era originalmente a entrada) , e executar este em um recipiente de resíduos.
2

bomba através de uma série de solventes em ordem decrescente de polaridade . Uma série básica recomendada é começar com metanol , em seguida, progride através acetonitrilo , acetonitrilo /isopropanol ( 75:25 ) , o isopropanol, o cloreto de metileno e hexano . Se a fase móvel inicialmente sentado na coluna era de um tampão , uma lavagem com água deve preceder o metanol . Uma taxa de fluxo de 1 a 2 mililitros por minuto é normalmente adequado , e cerca de 10 volumes de coluna de cada um solvente deve ser bombeada através de . O volume da coluna é o espaço interno não ocupados por embalagem e é calculado como ( 0,7 x pi x (ID /2) ^ 2 x L ), onde ID é diâmetro e L interna da coluna é o seu comprimento .
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3

bomba mais 10 volumes de isopropanol coluna através da coluna para o preparar para utilização com a fase móvel inicial. Se a fase móvel original em buffer, também bombear água através da coluna após o isopropanol antes de retornar para a fase móvel tampão originais.
4

Desligue a coluna e reverter e voltar a ligá -lo para que ele está em sua configuração normal ( isto é, com a fase móvel a ser bombeado para a entrada da coluna ) . Volte a ligar a saída da coluna ao detector.