Cientistas manter uma ampla variedade de células em laboratório para acrescentar à nossa compreensão de como as células crescem , se multiplicam e morrem. Para manter as células , os cientistas se dividem periodicamente - subcultura ou split - los em meio de crescimento fresco. Subcultura

As células são cultivadas em suspensão em meio de cultura ou ligado para pratos de Petri de plástico ou frascos . Como as células crescem tornam-se mais densa , use os nutrientes e excretar os resíduos para o meio . Portanto , as células devem ser regularmente dividida em números menores e dado meio fresco - geralmente em um número específico de células por prato

Método

Contagem e diluir as células em suspensão. em meio fresco. Para as células unidas , retire meio gasto e lavar cuidadosamente as células com um tampão salina. Expor as células a uma solução enzimática ou sal para quebrar célula-célula e conexões de células - prato - tripsina é mais comumente usado . Parar a reacção enzimática , com a adição de soro animal , colocar mistura de células num tubo de centrifugação e em uma centrífuga . Remover líquidos , células delicadamente ressuspender em meio fresco , contar e dispersá-los na densidade desejada.

Considerações

células Subcultura em um ambiente estéril com material esterilizado para evitar a contaminação bacteriana ou fúngica . A densidade celular , a quantidade de tempo em tripsina e frequência subcultura são todos dependentes do tipo de célula . Use um microscópio para monitorar regularmente células.