Bactérias são ferramentas úteis na modificação genética. Através da utilização de plasmídeos , porções circulares de ADN bacteriano permutáveis ​​, os organismos , tais como outras bactérias , pode ser transformada geneticamente . Este guia descreve os métodos básicos envolvidos no uso de bactérias para a engenharia genética de um outro organismo . Coisas que você precisa
espécies de bactérias não- letais (de preferência uma variante inofensiva de Escherichia coli )
Segundo espécies de bactérias não-letais
Petri
Bactérias incubadora
As enzimas de restrição para o gene alvo
2 laços estéreis
banho de água quente
Test tube
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Preparando o gene de interesse
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obter uma amostra das primeiras bactérias espécie de raspagem da colônia fechada com uma alça estéril .
2

Acene o loop inoculado em um tubo de ensaio por meio de um banho de água a cerca de 48 graus Celsius durante cinco segundos.
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Adicione algumas gotas de enzima de restrição para o tubo de ensaio e loop aquecida, inoculado . Esta enzima de restrição varia de acordo com o gene de interesse que serão transferidos para as outras espécies bacterianas.
Transformar as outras bactérias de espécies
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Mergulhe uma segunda alça estéril em uma colónia da segunda espécie de bactérias , o que é para ser transformado .
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propagação das bactérias de forma uniforme através de uma placa de Petri contendo meio de agarose , fazendo deslizar o loop inoculados através da agarose .
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Deixe as bactérias incubar durante dois dias numa incubadora , de tal modo que as colónias de bactérias são formadas .
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Adicionar a mistura criada anteriormente contendo o gene de interesse para a placa de Petri contendo o colônias bacterianas .
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Deixe as bactérias incubar por dois dias na incubadora . Isto permite que as espécies de captar os genes adicionados ao prato e inseri-los nos seus genomas .
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Formular um método para testar as bactérias transformadas para ver se eles assimilado os genes . Por exemplo , se o gene adicionado concede a bactéria a resistência aos antibióticos , que pode ser prático para adicionar discos de ampicilina para a placa de ágar . Se eles sobreviverem , eles pegaram o gene .